Как диагностировать бактериальные болезни

Метод визуального анализа симптомов

Определить бактериальные болезни визуальным методом, в большинстве случаев, невозможно. Возможно только в тех случаях, если симптомы имеют специфический характер. Наличие экссудата часто указывает на бактериальную природу некрозов.

Метод микроскопического анализа с использованием окрашивания

Препарат готовится из тканей, которые находятся между здоровой и пораженной тканью. В результате окрашивания (например, по Граму) дает возможность распознать бактериальные клетки в ткани растения-хозяина.

Микробиологический метод

Возбудителя выделяют из пораженной ткани растения и выращивают на искусственной питательной среде. Только при этом нужно установить патогенность изолятов бактерий, то есть способность патогена вызывать на растениях, которые искусственно инфицированы, такие же симптомы, какие были на исследуемом растении в результате естественного поражения. То есть действуют в соответствии с правилом Роберта Коха, которое называется триада Коха. Метод состоит из трех этапов: выделение возбудителя, заражение растения и выделение из него возбудителя.

Серологический метод

Сущность метода такая же, как при диагностике вирусов. Различия серологической диагностики бактерий от диагностики вирусов состоит в том что бактериальные клетки имеют кроме белков, которые специфичны для вида, еще и белки, которые являются общими для рода и семейства бактерий. Поэтому чтобы получить специфичную антисыворотку используют только видоспецифичные белки или антигены. Наиболее популярными серологическими методами являются иммуноферментный анализ и реакция иммунофлуоресценции. В наше время есть доступные дианогостические наборы, с помощью, которых можно идентифицировать зараженость семян томата бактериальным раком.

Молекулярный метод

Среди диагностических методов, которые основаны на использовании полиморфизма молекулы ДНК бактерий, самым распространенным есть амплификация видоспецифичных последовательностей ДНК в ходе полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод основан на синтезе («умножении») отдельных фрагментов ДНК, которые характерны только для одного вида бактерий. Фрагмент ДНК может «умножаться» в сотни, тысячи и миллионы раз, все зависит от специфики диагностики определенного вида. Дальше фрагмент обнаруживается при помощи электрофореза в агарозном геле или по флуоресценции исходного раствора.

Метод, является довольно чувствительным (для диагностики будет достаточно 10^-11 г бактериальной ДНК), быстрым (5-8 часов), высоконадежным, точным (100%). К недостаткам можно только отнести высокую стоимость реактивов и оборудования, что влечет за собой и высокую себестоимость самой диагностики. Для проведения диагностики бактерий методом ПЦР, также важно предварительно изучить разнообразие ДНК ФПБ.